NY∕T 564-2016 猪巴氏杆菌病诊断技术(农业)

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2021-12-25

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ICS 11 .220,B 41 NY,中华人民共和国农业行业标准,NY /T 564-2016,代替NY/T 564-2002,猪巴氏杆菌病诊断技术,Diagnostic techniques for swine pasteurellosis,2016 -1 0 一26 发布2017 -04 一01 实施,中华人民共和国农业部发布,NY/ T 564-2016,目。昌,本标准按照GB/ T 1. 1-2009 给出的规则起草,本标准代替NY/ T 564- 2002 (( 猪巴氏杆菌病诊断技术》。与NY / T 564一2002 相比,除编辑性修,改外,主要技术变化如下:,一一"范围"部分增述了多杀性巴氏杆菌定种的PCR 鉴定方法和英膜定型的多重PCR 鉴定方法的,适用性(见1);,一一"临床诊断"及"病理剖检"部分参照《兽医传染病学)) C 陈溥言主编)中相关描述进行了修改(见,2 矛日3) ;,一一"病原分离"部分删除了不适宜多杀性巴氏杆菌生长的麦康凯琼脂培养基,并将改良马丁琼脂,培养基和马丁肉汤培养基改为更适宜多杀性巴氏杆菌生长的膜蛋白大豆琼脂培养基和膜蛋白,大豆肉汤培养基(见4 . 1. 1. 1);,一一新增了定种PCR 鉴定方法(见4 . 的;,一一一"英膜血清型鉴定"部分在原有的间接血凝试验CCarter 氏英膜定型法)的基础上又新增了另一,种选择多重PCR 英膜定型法,并对多杀性巴氏杆菌间接血凝试验程序表也进行了完善,(见4 . 5 . 1. 3 和4.5.2) ;,一一"附录A"部分增添了膜蛋白大豆琼脂培养基CTSA) 和膜蛋白大豆肉汤培养基CTSB) 的制备方,法(见附录A. 6 和A. 7) ,本标准由农业部兽医局提出,本标准由全国动物卫生标准化技术委员会CSAC/ TC 18 1)归口,本标准起草单位: 中国兽医药品监察所,本标准起草人:蒋玉文、张援、李建、李伟杰、魏财文,本标准的历次版本发布情况为:,一一-NY/ T 564-2002 ,I,NY/ T 564-2016,猪巴氏杆菌病诊断技术,1 范围,本标准规定了猪巴氏杆菌病诊断的技术要求,本标准所规定的临床诊断、病理剖,用于多杀性巴氏杆菌种的鉴定;,的鉴定; 琼脂扩散沉,2 临床诊断,潜伏期ld ~,2. 1 最急性型,2. 1. 1 突然,2. 1.2,2. 1.3,势,伸,2. 1. 4,2. 2. 1,2. 2. 3,2. 3 慢性型,2. 3. 1 持续性,2. 3. 2,2. 3. 3 关节肿胀,2. 3. 4 食欲不振,进行性营养,3 病理剖检,3. 1 最急性型,适用于猪巴氏杆菌病的诊断。定种PCR 适,适用于多杀性巴氏杆菌英膜血清型,心跳加快,难,常做犬坐姿,疼痛,昕诊有,3. 1. 1 皮肤有红斑;切开颈部皮肤时,可见大量胶冻样蛋黄或灰青色纤维素性结液; 咽喉部及其周围结,缔组织出血性浆液浸润; 全身勃膜、浆膜和皮下组织有大量出血点; 水肿可自颈部蔓延至前肢,3. 1.2 全身淋巴结出血,切面红色,3. 1.3 心外膜和心包膜有小出血点,3. 1.4 肺急性水肿,3. 1.5 脾有出血,但不肿大,l,NY /T 564-2016,3. 1. 6 胃肠黠膜有出血性炎症变化,3. 2 急性型,3. 2. 1 胸腔及心包积液; 胸腔淋巴结肿胀,切面发红,多汁;全身茹膜、浆膜实质器官和淋巴结出血性病,理变化,3.2.2 纤维素性肺炎,肺有不同程度的肝变区,周围伴有水肿和气肿,病程长的肝变区内还有坏死灶,肺小叶间浆液浸润,切面呈大理石样纹理;胸膜常有纤维素性附着物,严重的胸膜与病肺粘连,3. 2. 3 支气管、气管内含有多量泡沫状茹液,蒙古膜发炎,3. 3 慢性型,3. 3. 1 肺肝变区扩大井有黄色或灰色坏死灶,外面有结缔组织包裹, 内含干酷样物质,有的形成空洞并,与支气管相通,3. 3. 2 心包与胸腔积液,胸腔有纤维素性沉着,3. 3. 3 肋膜肥厚,与病肺粘连;在肋间肌、支气管周围淋巴结、纵隔淋巴结以及扁桃体、关节和皮下组织,可见有坏死灶,4 病原分离鉴定,4. 1 病原分离,4. 1. 1 材料,4. 1. 1. 1 培养基,膜蛋白大豆琼脂培养基CTSA , 配制见A. 6) 、膜蛋白大豆肉汤培养基CTSB ,配制见A. 7) ,4. 1. 1. 2 试剂,绵羊脱纤币1 、绵羊裂解血细胞全血、健康动物血清,4. 1. 2 器材,二级生物安全柜、恒温培养箱C3rC) ,4. 1.3 操作,猪濒死或死亡后,无菌采取病死猪的心血或肝脏组织,接种含4 %健康动物血清的TSB ,置350C ~,3rc 培养16 h ~24 h 。取TSB 培养物划线接种含0 . 1 % 绵羊裂解血细胞全血和4 % 健康动物血清的,TSA 平板,置350C ~3 rc 培养16 h~24 人挑取在TSA 平板上生长的光滑圆整的单个菌落传代接种,含0 . 1 %绵羊裂解血细胞全血和4 %健康动物血清的TSA 平板,置350C~3rc 培养16 h ~ 24 h ,获得纯,培养物,4. 2 病原鉴定,4.2. 1 材料,4. 2. 1. 1 待检样品,分离的细菌纯培养物,4. 2. 1. 2 培养基,培养基质量满足GB/ T 4789. 28 规定的要求,按附录A 方法配制改良马丁琼脂(配制方法见,A.的、马丁肉汤(配制方法见A. 5) 、麦康凯琼脂(配制方法见A. 13) 、运动性试验培养基(配制方法见,A.的,4.2. 1. 3 试剂,葡萄糖、展糖、果糖、半乳糖、甘露醇、鼠李糖、戊醒糖、纤维二糖、棉子糖……

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